高效液相色谱法的优点和常见问题?
NEWS | 2022-09-18 09:11
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??? 高效液相色谱法的主要优点是:
??? (1)分辨率高于其他色谱方法
??? (2)速度快,十分钟至十分钟即可完成;
??? (3)高可重复性;
??? (4) HPLC柱可重复使用;
??? (5)全自动操作,分析精度高。
??? 根据分离过程中溶质分子与固定相相互作用的不同,高效液相色谱可分为液液色谱、离子交换色谱、液固色谱、和体积排除色谱四种基本类型。
??? 高效液相色谱法广泛应用于生物领域,用于以下产品的分离和鉴定:
??? (1)氨基酸及其衍生物;(2)有机酸;(3)抗生素;(4)生物碱;(5)核酸及其降解产物;(6)糖;(7)卟啉;(8)类固醇;9 .蛋白质、酶和多肽;(10)脂质等。
??? 高效液相色谱法常见的问题有:
??? 1.
涡流扩散
??? 当流动相与较大的固体颗粒碰撞时,就会产生涡流,就像流水与石头碰撞一样。如果柱内填充不均匀,部分部位疏松或有细槽,流动相速度快;如果某些部位结块或安装紧密,流动就会变慢,多条流动路径会快慢不一,会使区域变宽。
??? 2. 分子扩散
??? 分子扩散是指物质分子从高浓度区域向低浓度区域的运动,又称纵向分子扩散。为了减少分子的扩散,应该使用小而均匀的固体颗粒进行柱载。
??? 3.传质
??? 分离出的物质应在流动相和固定相中平衡,形成窄带。在液相色谱法中,溶质分子在两液相之间分布或在固相上吸附和解析需要一定的时间。
??? 4. 流动相流量
??? 当流速过低时,分子扩散严重,特别是在气相色谱中。如果将理论塔板的高度与流速绘制成曲线,则理论塔板的高度随着流速的增加而迅速减小。当达到最小值时,流速再次增大,理论塔板高度再次增大,传质起主要作用。
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以上就是有关于高效液相色谱法的主要优点和常见问题介绍,如果您还想了解关于仪器资讯,欢迎咨询客服人员了解。
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